huH-1细胞系来源于一名53岁亚洲日本籍男性肝细胞癌患者的肝组织，是一种HBV阳性的人肝癌细胞系。该细胞系是研究HBV相关肝癌发病机制、HBV整合致癌以及肝癌药物筛选的理想模型。
细胞基本信息：
- JCRB编号：JCRB0199
- 组织来源：人肝脏（原发性肝细胞癌）
- 供体信息：53岁，亚洲日本籍男性
- 建系时间：2002年
- 该细胞已通过STR鉴定
细胞形态及生长特性：
- 细胞形态：上皮细胞样
- 生长方式：贴壁生长
- 致瘤性：在裸鼠体内能形成肿瘤
病毒感染状态：
该细胞检测到乙型肝炎病毒（HBV），具有高转录活性，在培养基中持续产生HBs抗原，是研究HBV感染与肝癌发生关系的理想模型。其他常见病毒检测参考JCRB认证体系的质量控制标准。
培养基：
- 基础培养基：90%DMEM+10%胎牛血清（FBS）
- 培养条件：37°C，5%CO₂
细胞培养注意事项：
1、细胞复苏与接种密度
- 将冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入预热的完全培养基混合均匀。
- 建议1000rpm离心3-5分钟，弃上清后重悬细胞。
- 接种密度建议为2-6×10⁴cells/mL，以确保细胞能顺利进入对数生长期。
2、传代操作
消化：细胞生长至80-90%融合时进行传代。吸弃旧培养基，用PBS(-)清洗一次后，加入0.25%胰蛋白酶 -0.02%EDTA溶液，在37°C下消化约5-10分钟。
终止与接种：待细胞变圆、部分脱落时，立即加入含血清的新鲜培养基终止消化，轻轻吹打制成单细胞悬液。按1:10的比例稀释后接种至新培养瓶
3、换液频率
- 常规培养时，根据细胞生长速度和培养基颜色变化（酚红指示剂），通常每2-3天更换一次新鲜培养基。
4、冻存方法
- 冻存液配方（推荐）：10%DMSO，20%FBS-DMEM。
- 冻存步骤：使用程序冻存盒（4°C静置5-10分钟 →-20°C静置2小时→-80°C过夜）后，转移至液氮中长期保存。
- 注意事项：冻存前后建议监测HBV DNA拷贝数。
5、质量检测
该细胞已通过支原体检测（阴性）、细菌和真菌检测（阴性），经STR鉴定确认细胞身份正确。
研究应用：
- HBV相关肝癌研究：huH-1是研究HBV整合致癌机制的理想模型，广泛应用于HBV感染与肝癌发生关系的研究。
- 肝癌分子机制研究：适用于肝癌细胞转化、肝癌进展和药物反应机制的研究。
- 信号通路研究：可用于探索Wnt/β-catenin、PI3K/AKT和MAPK等信号通路在肝癌中的异常活化。
- EMT与转移机制研究：适合研究上皮-间充质转化和血管生成相关因子在肝癌转移中的调控作用。
