该细胞系是从一名45岁日本侵袭性NK白血病患者的血液中建立的一种自然杀伤(NK)白血病细胞系KHYG-1,且在TP53 (p53) 基因第248位密码子携带点突变。KHYG-1细胞在体外显示出NK细胞活性和IL-2依赖性增殖。
KHYG-1细胞
淋巴细胞样,悬浮生长

病毒污染检测:
通过实时荧光定量PCR检测病毒基因组片段,结果显示16种常见病毒均为阴性。
90% DMEM + 10%FBS+100 units/mL of rIL-2(该细胞系必须确保培养基中含有足量且具有活性的IL-2(常用100 IU/mL)。建议使用高质量的重组人IL-2,并注意分装保存,避免反复冻融失活。)
培养中的注意事项:
自然杀伤细胞系(NK)通常对冻融反应较弱,对培养条件敏感。KHYG-1细胞系也是如此。
细胞密度
KHYG-1的生长往往依赖于高细胞密度。如果解冻后细胞系的状况没有改善,最简单的方法将是倾斜培养。使培养瓶倾斜,以实现培养瓶底部的局部高细胞密度。
培养基换液方法
人类造血细胞系对培养条件敏感。细胞系本身在培养基中分泌生长因子和存活因子。因此,过度稀释或过于频繁的培养基换液,可能会对细胞产生相当大的危害。只需将新鲜培养基添加到含有细胞的旧培养基中即可。
RPMI 1640的pH值
酚红指示的介质颜色应为橙色。如果培养基颜色是粉红色或紫色,则不合适。
当培养结果不佳时的处理
增加胎牛血清的浓度(如20%)可能会改善培养条件。此外,请尝试将IL-2浓度增加到200 U/mL。
关于IL-2的单位
IL-2产品可从许多制造商处获得。然而,不同制造商的产品之间的活度/U(单位)似乎不同。JCRB建议使用官方网站“LOT信息-培养基”(参考具体批次官网信息)中描述的同一制造商的IL-2产品。如果您使用其他制造商的IL-2产品,JCRB建议以200 U/mL的浓度进行培养。
KHYG-1的原始报告与JCRB细胞库的FACS分析在CD25(低亲和力IL-2R)表达方面存在差异。
根据寄存者的原始论文(Leukemia,14:922-930,2000),KHYG-1被描述为CD25阴性。然而,JCRB的FACS分析检测到KHYG-1中的CD25。
官方授权,渠道可查
自2006年起,比欧联科便与JCRB展开了合作。比欧联科凭借自身在国际运输、特殊物品和生物材料进口的专业性的优势,为用户提供外贸+物流+清关一体化解决方案,全方位保障细胞产品安全、准时送达用户手中。JCRB(Japanese Collection of Research Bioresources)现已正式授权比欧联科作为其在中国大陆地区的官方经销商,全面负责JCRB产品在中国的市场推广与销售工作。
极简流程
迅速到货
01
客户确认需求
02
与比欧联科签署进口协议
03
比欧联科代办前置审批文件
04
下单给JCRB
05
JCRB发货,比欧联科清关
06
货物送达用户手中
参考文献
1. A novel natural killer cell line (KHYG-1) from a patient with aggressive natural killer cell leukemia cahhying a p53 point mutation.
2. Yagita M,Huang CL,Umehara H,Matsuo Y,Tabata R,Miyake M,Konaka Y,Takatsuki K Leukemia. 2000 May;14(5): 922-30.