PC-12细胞从可移植性大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤中建立,是一株对神经生长因子(NGF)具有可逆响应的单克隆细胞系。具有均一的近二倍体染色体数目(40条)。经NGF处理一周后,PC12细胞停止增殖并开始延伸出分支状曲张突起,其形态与原代培养的交感神经元类似。NGF诱导持续数周后,PC12细胞的突起可生长至500-1000微米。撤除NGF后24小时内突起发生退行性变,72小时内细胞恢复增殖。无论是否经NGF处理,PC12细胞内均存在直径达350纳米的致密核嗜铬样颗粒。经NGF处理的细胞还含有聚集在突起曲张部位和末梢的小囊泡。PC12细胞能够合成并储存儿茶酚胺类神经递质多巴胺和去甲肾上腺素,其单位蛋白质含量的儿茶酚胺及其合成酶水平与大鼠肾上腺组织相当或更高。以单个细胞为基准计算时,NGF处理并未改变PC12细胞的儿茶酚胺及其合成酶水平;但以单位蛋白质含量为基准计算时,NGF处理导致该水平下降4-6倍。PC12细胞不合成肾上腺素,且地塞米松处理亦不能诱导其合成。PC12细胞系可作为神经生物学和神经化学研究的重要模型系统。
是否进行STR鉴定:
是
培养基:
85% RPMI 1640 + 10%马血清+5%FBS
(推荐使用热灭活的马血清培养该细胞)
细胞接种密度:
1.2 - 2.4 x 10^5 cells/mL
细胞贴附特性说明
● JCRB细胞库保存的PC-12细胞被标注为具有贴附性变异特征,但其实际贴附能力较弱。PC12细胞系最初建系时是悬浮细胞,JCRB细胞库保存的PC-12细胞也常出现不贴附、聚集成团增殖的情况。
●经JCRB细胞库测试发现,不同批次的马血清会显著影响JCRB0733株系的贴附性能。即使能够贴附,细胞复苏后通常需要数日时间才能完成贴壁。若细胞未贴壁而形成悬浮细胞团块(该团块由活细胞构成),可通过以下方法改善贴附性:
●更换为含10-15%胎牛血清(不含马血清)的RPMI1640培养基进行培养。
●使用明胶包被或胶原包被的培养器皿可显著提升贴附稳定性,此法无需更换血清类型。
●需特别注意的是:进行神经突起形态学观察时,胶原等基质包被是必需条件。未经包被处理的培养表面可能导致:(1)神经突起几乎无法延伸;(2)即使形成突起也易发生细胞脱壁。
在为PC-12细胞配制完全生长培养基时,需对马血清进行热灭活处理吗?
● 根据保藏机构的建议,采用热灭活马血清联合未做热灭活处理的胎牛血清的配制方案,可维持该细胞的前神经元表型。
官方授权,渠道可查
自2006年起,比欧联科便与JCRB展开了合作。比欧联科凭借自身在国际运输、特殊物品和生物材料进口的专业性的优势,为用户提供外贸+物流+清关一体化解决方案,全方位保障细胞产品安全、准时送达用户手中。JCRB(Japanese Collection of Research Bioresources)现已正式授权比欧联科作为其在中国大陆地区的官方经销商,全面负责JCRB产品在中国的市场推广与销售工作。
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参考文献
Establishment of a noradrenergic clonal line of rat adrenal pheochromocytoma cells which respond to nerve growth factor. Greene LA,Tischler AS Proc Natl Acad Sci U S A. 1976 Jul;73(7):2424-8