HuH-7细胞由日本Okayama大学Nakabayshi,H. & Sato,J.等人于1982年从一名57岁日本男性的高分化肝细胞癌肿瘤组织中分离建立。是研究肝病发病机制、HCV病毒复制机制及开发开病毒药物的理想模型。
细胞基本信息:
HuH-7, JTC-39
上皮样,贴壁生长

是(其中两个位点的鉴定结果)

病毒污染检测:
通过实时荧光定量PCR检测病毒基因组片段,结果显示16种常见病毒均为阴性。
培养基:
90% DMEM + 10%FBS(该细胞系可在无血清培养基中培养,细胞在生长过程中会向培养基中释放包括含甲胎蛋白在内的血清蛋白。)
细胞培养注意事项:
HuH-7 细胞所用 DMEM 培养基要求
用于 HuH-7 细胞培养的 DMEM(杜尔贝科改良伊格尔培养基)为低葡萄糖 DMEM 培养基。标准 DMEM 培养基即低葡萄糖配方,高葡萄糖 DMEM 是其改良版本。
切勿使用高葡萄糖 DMEM 培养基。已有多项报道指出,在 HuH-7 细胞培养中使用高葡萄糖 DMEM 会引发诸多问题。
标准 DMEM 培养基含有 L - 谷氨酰胺、丙酮酸钠和低浓度葡萄糖(1克/升)。培养基中不应添加 HEPES(4-羟乙基哌嗪乙磺酸)。
培养初始阶段的培养瓶(培养皿)规格
HuH-7 细胞解冻后能否立即存活,取决于细胞密度。请将一个冻存管中的所有细胞接种到1 个 T-25 培养瓶或1 个 6 厘米培养皿中。
接种前需通过短暂离心去除二甲基亚砜(DMSO)。
复苏培养和传代时,若细胞稀释度过高,可能导致细胞死亡或生长迟缓。
传代操作
对细胞进行胰酶消化时,需使用足量的胰酶溶液,之后通过短暂离心收集细胞。
若胰酶溶液用量不足,可能导致细胞干燥,进而对细胞造成损伤。
蛋白分泌:
据文献报道,该细胞在培养过程中产生的血清蛋白有:白蛋白、前白蛋白、α1-抗胰蛋白酶、铜蓝蛋白、纤维蛋白原、纤连蛋白、结合珠蛋白、血红素结合蛋白、β-脂蛋白、α2-巨球蛋白、β2-微球蛋白、转铁蛋白、脂蛋白、α2-巨球蛋白、β2-微球蛋白、转铁蛋白、补体成分C3和C4以及甲胎蛋白。在完全明确成分的合成培养基中生长的这些肝癌细胞系,可能为体外研究人肝癌细胞的生长与代谢提供新的途径。
支持HCV复制:
是首个被证实支持丙型肝炎病毒(HCV) 全长复制的细胞系,是HCV研究的重要细胞模型。
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参考文献
Growth of human hepatoma cells lines with differentiated functions in chemically defined medium.Nakabayashi H,Taketa K,Miyano K,Yamane T,Sato J Cancer Res. 1982 Sep;42(9):3858-63